选择性液体计数培养基的出厂检验及验收方法

一、选择性液体计数培养基的介绍
在GB4789.28中，列举了三个选择性液体计数培养基：月桂基硫酸盐胰蛋白胨大豆肉汤（LST）、煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）和EC肉汤，此类培养基主要用于特定菌株的MPN法计数，培养基本身具有一定的选择性，同时目标菌在培养基中可观察到产气反应，以此进行判断所检目标菌是否存在。
二、培养基的出厂检验
首先，将待测培养基（本次以BGLB培养基为例进行讲解）。按照说明书进行配制及灭菌，注意每管中需加入一个小倒管，用来观察是否产气。
使用前应观察倒管内是否存在气体，若倒管内存在气体，应排气后再使用。
1.目标菌的检验
按照GB4789.28标准，本次目标菌为大肠埃希氏菌和弗氏柠檬酸杆菌。
选择稀释至适宜梯度的目标菌的菌悬液（含菌量应在10-100CFU/mL，一般可选择 -7梯度的稀释样液），吸取1mL加入至待测培养基试管中，接种2支平行管。
同时使用TSA（或其他适宜培养基）进行倾注，计数接种量，吸取1ml菌液，加入空平皿中，倾入TSA,混匀，放置室温冷却，待凝固后，再倾入一层TSA，待其凝固后 , 置于标准中规定的条件下进行培养。
2.非目标菌的检验
选择稀释至适宜梯度的非目标菌的菌悬液，含菌量应在1000-5000CFU/mL，一般可选择 -5梯度的稀释样液），吸取1mL加入至待测培养基试管中，接种2支平行管，同时使用TSA（或其他适宜培养基）进行倾注（比接种梯度小1-2个稀释度），计数接种量。
3.结果判定
接种目标菌的试管浊度值应达到2，倒管内应有气体产生，气体充满倒管1/3以上。
接种非目标菌的试管浊度值应为0或1，无产气现象。
三、培养基的验收方法
将质控菌株（目标菌和非目标菌）都稀释至10-3，也可采用其他方法制备含菌量105-107CFU/mL的菌悬液，使用1μL接种环挑取1环菌液，接种至待测培养基中，置于标准规定的条件进行培养。
结果判定：接种目标菌的试管浊度值应达到2，倒管内气体充满1/3以上；接种非目标菌的试管浊度应为0或1，无产气现象。